產品名稱：BEL-7404(肝癌細胞)?

產品使用
1)本產品僅能用于科研

細胞培養操作規程，供參考

2） 含量：>1x10^6?1） 規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝細胞處理：

3） 污染：經檢測不含支原體、細菌、酵母和真菌

5） 形態：上皮細胞樣，貼壁4） 來源：ATCC

2）培養基及培養凍存條件準備：

3.客戶在細胞培養過程中，有任何技術問題可以聯系客服，我們隨時給予解答。

?1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。?注意事項：

?2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。?

TT細胞由Leong SS等，自一位77歲白人女性甲狀腺髓樣癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細胞持續產生高水平的降血鈣素和CEA。更換培養基后24h和72h，在培養基中檢測到的免疫活性的降血鈣素濃度分別為3900 pg/106個細胞和7700 pg/106個細胞。72小時后CEA積累濃度超過27 ng/106個細胞。

1、 準備F-12K培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

??1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

PC-3源于一位62歲白人男性前列腺腺癌患者的骨轉移灶，細胞的酸性磷酸酶活性和5-α-睪丸激素還原酶活性都較低。

2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

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通過一個pRSTV質料結構，用SV40大T抗原對基質細胞進行永生化。肌成纖維基質細胞株， WPMY-1與RWPE-1細胞一樣，來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區域的基質細胞。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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